四组分RNA依赖性技术是一种免疫地阻断某些蛋白质表达出来的研究者策略，在、致病，遗传病及其它疾病的治疗之前均有应用领域。比较慢大肠杆菌多种形式是一类叫作重四组逆转录大肠杆菌的多种形式，由于具有可以接种非分崩离析期与分崩离析期蛋白，容纳大的外源性意在 蛋白质片段，免疫小等特色，现已成为转到意在 蛋白质进入脊椎动物蛋白的理想多种形式。将比较慢大肠杆菌多种形式应用RNA依赖性当之前，可以免疫抑制脊椎动物的各类蛋白之前蛋白质的表达出来，成为蛋白质功能研究者和蛋白质治疗的令人吃惊策略。现在研究者表明比较慢大肠杆菌多种形式能在脊椎动物各类蛋白比较稳定表达出来siRNA，长期抑制蛋白质表达出来。为建立蛋白模型近期蛋白质治疗提供有效的研究者策略。
生博现在为客户挑选出过几百种蛋白质的依赖性片断，并通过比较慢大肠杆菌取得几十种比较稳定蛋白株。为近期研究者蛋白质治疗提供了有效依据。
BXXX1蛋白质依赖性比较稳定HeLa蛋白株构建
第一其余部分：BXXX1依赖性多种形式构建（多种形式pMagic 4.1）
siRNA所设计：
MarkergeneGene IDTargetSeqGC%KD1BXXX1NM_XXX4 GCCXXXXXXXXXXXXXGA47.4 KD2BXXX1NM_XXX4GGTXXXXXXXXXXXXXTAT52.6KD3BXXX1NM_XXX4CCAXXXXXXXXXXXXXTTT52.6KD4 BXXX1NM_XXX4GCAXXXXXXXXXXXXXGAA47.4pLVT4NC TTCTCCGAACGTGTCACGT 52.6第二其余部分QPCR筛靶测试
Real-time PCR侦测结果显示： HeLa蛋白之前，相对NC四组， 四个内源性之前，KD2，KD4对意在蛋白质BXXX1的表达出来的敲减半可靠性远超80%以上，KD3对意在蛋白质BXXX1的表达出来的敲减半可靠性也远超50%以上，都是有效内源性。
第三其余部分Western blot内源验证测试报告
Western Blot侦测结果
混合物概述:
M 为Marker；
1 CON为出现异常意在自造蛋白（HeLa）混合物；
2 NC为出现异常意在蛋白（HeLa），延特征性对照致病的蛋白混合物（Negative Control）；
3 KD为出现异常意在蛋白（HeLa），延RNAi内源性致病的蛋白混合物（Knock Down）
从Western Blot结果可以看出，KD1，KD2内源性对HeLa蛋白BXXX1的表达出来有敲减半效果，为有效内源性。
第四其余部分：依赖性比较慢大肠杆菌KD1.、对照比较慢大肠杆菌CMV-GFP-L.V.接种HeLa蛋白株后挑选出比较稳定株。
HeLa 白光四组 White light发光四组 Fluoresce 一定量度 Day 3， 100× BlankKD1 MOI 10KD1 MOI 20CMV-GFP MOI 10CMV-GFP MOI 20三、测试论述：
1、HeLa蛋白接种KD1.比较慢大肠杆菌，MOI 10、MOI 20时毒性大，死蛋白多。若只计活蛋白，接种可靠性高，都超过80%。
2、HeLa蛋白接种CMV-GFP-L.V.比较慢大肠杆菌，MOI 10、MOI 20时接种可靠性高，都超过90%。
3、传代培养后，最终挑选出出HeLa- KD1 MOI 10比较稳定株，HeLa- KD1 MOI 20比较稳定株、HeLa- CMV-GFP MOI 20比较稳定株。
校对： 陈相关新闻
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